藥物研發(fā)中穩(wěn)定性研究是一項(xiàng)重要的研究?jī)?nèi)容。其中使用期間穩(wěn)定性試驗(yàn)是考察包裝制劑對(duì)臨床和患者安全使用不可或缺的內(nèi)容，其主要針對(duì)兩部分制劑：

1、使用前需要重新配制的制劑，主要考察藥物在配制或稀釋過(guò)程中不同種類、不同形態(tài)、不同體積的組分在混合過(guò)程中可能會(huì)發(fā)生各種化學(xué)物理變化，從而產(chǎn)生新的降解產(chǎn)物導(dǎo)致雜質(zhì)譜的改變，以及在配制過(guò)程中可能引入的細(xì)菌、微生物等新的污染；

2、多劑量包裝制劑，主要是初次使用后會(huì)不可避免地接觸到空氣、水分、光等外界因素從而可能影響含量、外觀、產(chǎn)生新的降解產(chǎn)物，重復(fù)打開(kāi)使用和關(guān)閉操作也可能導(dǎo)致微生物的污染，細(xì)菌繁殖等。對(duì)于注射給藥制劑、眼用制劑以及吸入制劑，由于此類制劑對(duì)于微生物限度要求較高，如果藥物在使用期間質(zhì)量不符合要求會(huì)造成潛在的安全隱患，因此使用期間穩(wěn)定性試驗(yàn)顯得尤為重要。

針對(duì)此，EMA、ICH和WHO等均發(fā)布了相關(guān)指導(dǎo)原則從而有效指導(dǎo)了使用期間穩(wěn)定性試驗(yàn)的開(kāi)展。筆者將從1、批次的選擇及考察時(shí)期，2、試驗(yàn)期間樣品放置條件，3、考察指標(biāo)，三個(gè)方面對(duì)各指導(dǎo)原則中穩(wěn)定性研究的技術(shù)要求進(jìn)行探討并對(duì)比，幫助申請(qǐng)人更好的辨別不同申報(bào)方向的上市申報(bào)的具體要求，更有利于產(chǎn)品的上市注冊(cè)申報(bào)。

01

批次的選擇及考察時(shí)期

EMA和WHO均要求至少考察兩批，其中一批至少為中試規(guī)模，至少一批為近效期樣品，若遞交時(shí)不能獲得近效期樣品，如果申報(bào)時(shí)不能獲得近效期樣品，則在申報(bào)時(shí)可獲得的最后一個(gè)時(shí)間點(diǎn)取樣考察。EMA同時(shí)要求使用的包裝系統(tǒng)應(yīng)等同于上市包裝系統(tǒng)，針對(duì)樣品為多個(gè)規(guī)格或采用多種包裝材料，可以采用最容易引起變化的規(guī)格或包裝，同時(shí)給出選擇理由。

ICH要求采用與穩(wěn)定性試驗(yàn)相同的主批次，但未明確采用的批次數(shù)目。應(yīng)在長(zhǎng)期穩(wěn)定性開(kāi)始及試驗(yàn)結(jié)束時(shí)取樣考察。如果申報(bào)時(shí)不能獲得近效期樣品，則在第12個(gè)月或申報(bào)時(shí)可獲得的最后一個(gè)時(shí)間點(diǎn)取樣考察。

FDA未明確采用的批次數(shù)目以及考察時(shí)期。

CDE在化學(xué)藥品注射劑仿制藥質(zhì)量和療效一致性評(píng)價(jià)技術(shù)要求里指出，對(duì)于穩(wěn)定性差的產(chǎn)品，臨床配伍穩(wěn)定性研究應(yīng)至少包括兩批自制樣品（建議其中一批未近效期樣品），其他產(chǎn)品可采用一批自制樣品。對(duì)于生物制品國(guó)內(nèi)尚無(wú)明確的法規(guī)要求，大多數(shù)的生物制品穩(wěn)定性較差，若按照以上化藥的批次選擇的原則，生物制品上市申報(bào)時(shí)，是不是也得考察至少兩批自制樣品呢？讓我們拭目以待CDE后續(xù)的針對(duì)生物制品的法規(guī)要求。

02

試驗(yàn)期間樣品放置條件

EMA和WHO規(guī)定應(yīng)盡可能模擬藥物使用的實(shí)際過(guò)程，考慮容器的填充體積以及使用前的配制和稀釋過(guò)程。如果在實(shí)際中需要抽取一定量的藥物或藥液，則試驗(yàn)時(shí)應(yīng)模擬同樣的情形。取樣測(cè)定時(shí)應(yīng)置于實(shí)際的使用環(huán)境下進(jìn)行。

ICH和FDA指出，產(chǎn)品復(fù)溶或稀釋后的穩(wěn)定性考察，為說(shuō)明書中的產(chǎn)品復(fù)溶或稀釋配制、存儲(chǔ)條件和使用期限提供依據(jù)。

CDE在生物制品穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則以及創(chuàng)新藥（化學(xué)藥）III期臨床試驗(yàn)藥學(xué)研究信息指南中均指明，此部分信息應(yīng)能支持臨床方案中的用法，以評(píng)估實(shí)際使用情況下產(chǎn)品的穩(wěn)定性。

綜上，使用期間穩(wěn)定性樣品的放置條件應(yīng)盡可能模擬實(shí)際的使用過(guò)程，包括用法、用量以及待測(cè)樣品的放置條件。

03

考察指標(biāo)

EMA和WHO指出，能反應(yīng)使用過(guò)程中穩(wěn)定性變化的物理、化學(xué)、生物及微生物指標(biāo)需要被監(jiān)測(cè)，EMA提供示例如下：

物理：顏色、澄清度、包裝完整性、不溶性微粒、粒徑

化學(xué)：API含量、防腐劑含量、抗氧劑含量、pH

微生物：總菌落數(shù)、無(wú)菌

FDA還指出，針對(duì)無(wú)菌且使用前需要復(fù)溶（或進(jìn)一步稀釋）的產(chǎn)品，申請(qǐng)人需要進(jìn)行微生物試驗(yàn)以支持說(shuō)明書中產(chǎn)品復(fù)溶后或稀釋后的最差儲(chǔ)存條件，該試驗(yàn)作為一項(xiàng)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估應(yīng)能證明復(fù)溶后或稀釋后的產(chǎn)品在擬定的儲(chǔ)存條件下，污染的外來(lái)微生物不會(huì)增長(zhǎng)（即增長(zhǎng)量不超過(guò)0.5log10）。

CDE在多篇已發(fā)表的公開(kāi)文獻(xiàn)中指出，制劑與葡萄糖注射液進(jìn)行配伍試驗(yàn)時(shí)，需要考察5-羥甲基糠醛的變化情況。從近兩年CDE針對(duì)上市申請(qǐng)項(xiàng)目的補(bǔ)充資料通知中也可以看出，凡是與葡萄糖注射液配伍均被要求監(jiān)測(cè)5-羥甲基糠醛的變化情況。

此外，各指導(dǎo)原則均要求，使用期間的穩(wěn)定性測(cè)試所采用的分析方法必須經(jīng)過(guò)驗(yàn)證（包括國(guó)內(nèi)要求的5-羥甲基糠醛的檢測(cè)方法），證明其精密度、靈敏度、準(zhǔn)確度和重現(xiàn)性等符合相應(yīng)的要求。

從以上總結(jié)可以看出，不同方向?qū)τ谑褂闷陂g的穩(wěn)定性具體的要求也不同。在設(shè)計(jì)使用期間穩(wěn)定性試驗(yàn)時(shí)，建議按照申報(bào)方向的具體要求，同時(shí)結(jié)合其他方向的要求，模擬真實(shí)使用情況，設(shè)計(jì)合理的試驗(yàn)策略，全面考察臨床使用期間穩(wěn)定性。目前國(guó)內(nèi)對(duì)使用期間穩(wěn)定性試驗(yàn)的具體要求還不是特別明確，尤其是針對(duì)生物制品使用期間穩(wěn)定性試驗(yàn)的相關(guān)要求還有待完善。

關(guān)于皓陽(yáng)生物

杭州皓陽(yáng)生物技術(shù)有限公司成立于2015年，專注于為抗體/重組蛋白客戶提供早期成藥性評(píng)估、抗體藥物偶聯(lián)開(kāi)發(fā)、穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建、工藝開(kāi)發(fā)、中試生產(chǎn)、IND申報(bào)和臨床樣品生產(chǎn)，培養(yǎng)基開(kāi)發(fā)定制等多平臺(tái)一站式研發(fā)服務(wù)。在上海杭州兩地設(shè)有研發(fā)中心和生產(chǎn)基地，目前擁有員工180余人。上海研發(fā)中心依托多種分析手段和瞬時(shí)表達(dá)平臺(tái)為客戶提供從人源化設(shè)計(jì)，活性分析到成藥性分析多維度的分子設(shè)計(jì)和評(píng)估。杭州中心擁有自主開(kāi)發(fā)可授權(quán)的高表達(dá)穩(wěn)定細(xì)胞株平臺(tái)（皓越）和工藝開(kāi)發(fā)平臺(tái)，建有完善的250L和500L規(guī)模原液和成品GMP生產(chǎn)線，能夠在8個(gè)月左右提供從DNA到毒理批樣品交付，12-15個(gè)月內(nèi)完成IND申報(bào)準(zhǔn)備工作。同時(shí)公司還在建6*2000L商業(yè)化生產(chǎn)線，預(yù)計(jì)于2024年底陸續(xù)投入使用。皓陽(yáng)生物致力于通過(guò)幫助新藥研發(fā)，推動(dòng)生物醫(yī)藥領(lǐng)域的進(jìn)步，實(shí)現(xiàn)創(chuàng)新為民、科技惠民的目標(biāo)。

公司立足中國(guó)，實(shí)踐?“聆聽(tīng) 深耕 開(kāi)拓 共贏”的企業(yè)精神，努力打造一個(gè)行業(yè)地位突出，管理先進(jìn)的現(xiàn)代化企業(yè)。